ISO 21149

ISO 21149 規格には、化粧品中の好気性中温菌の計数と検出のための試験方法が含まれており、次の 2 つの異なるガイドラインが示されています。

- 好気性インキュベーション後に寒天培地上でコロニーを数える、または
- 濃縮後に細菌の増殖がないことを確認します。

ISO 21149 規格に基づく一般的な方法による。これには、非選択寒天培地上または濃縮後の細菌増殖の有無に基づいてコロニーを計数することが含まれます。

生きた微生物を検出できるようにするには、サンプルによる微生物の増殖の阻害の可能性を中和する必要があります。どのような場合でも、どのような方法論であっても、製品の抗菌特性の中和をチェックして確認する必要があります。

もう 1 つの方法は「プレート計数」 です
プレート計数は次の手順で構成されます。
⎯ 特定の培養物を使用した注釈プレートまたは塗抹プレートの準備
⎯ 32.5 °C ± 2.5 °C で 72 時間 ± 6 時間、プレートを好気的にインキュベートします。
⎯ コロニーの数形成単位 (CFU) は、製品 1 ミリリットルまたはグラムあたりの好気性中温菌の数を数えて計算します。

3 番目の方法「膜ろ過」
膜ろ過は次の手順で構成されます。
⎯ 適量の検証済みサンプルを少量に添加します。適切な滅菌希釈剤を加えます。水で湿らせた濾過装置に移し、直ちに排水し、検証された手順に従って洗浄します（13.3.4 を参照）。 ISO 21148 に規定されているように、メンブレンフィルターを指定の寒天培地の表面に移します。
⎯ 32.5 °C ± 2.5 °C で 72 時間 ± 6 時間、メンブレンを好気的にインキュベートします。
⎯ コロニー形成単位CFU の数を数え、製品 1 ミリリットルまたはグラムあたりの好気性中温菌の数を計算します。

4 番目の方法は「濃縮による細菌の検出」
濃縮による細菌の検出は次の手順で構成されます。
⎯ 32.5 °C ± 2.5 規定量の出発懸濁液を、適切な中和剤および/または分散剤を含む非選択性液体培地中、℃で少なくとも 20 時間インキュベートします。
⎯ 規定量の以前の懸濁液を非選択媒体に移します。選択固体寒天培地。
⎯ 32.5 °C ± 2.5 °C で 48 時間から 72 時間好気培養。
⎯ 製品サンプル S あたりの好気性中温菌の増殖を検出し、結果を「存在」として表示/不在"。