ISO 21149

ISO 21149 标准包括化妆品中需氧嗜温细菌计数和检测的测试方法，给出了两种不同的指导方针：

- 通过在需氧培养后对琼脂培养基上的菌落进行计数或
- 检查富集后是否没有细菌生长。通过

ISO 21149标准下的通用方法；它涉及根据在非选择性琼脂培养基上或富集后是否存在细菌生长来计数菌落。

样品可能对微生物生长的抑制应被中和，以便检测活微生物。在任何情况下，无论采用何种方法，都必须检查和确认产品抗菌性能的中和。

另一种方法是“平板计数”
平板计数包括以下步骤：
⎯ 使用特定培养物制备倾倒平板或涂片平板使用规定量的初始悬浮液或产品稀释液对平板进行培养基和接种。
⎯平板在 32.5 °C ± 2.5 °C 下有氧培养 72 小时 ± 6 小时。
⎯ 菌落数形成单位（CFU）计数和计算每毫升或每克产品中需氧常温细菌的数量。

第三种方法“膜过滤”
膜过滤包括以下步骤：
⎯加入适量的验证样品至少量合适的无菌稀释剂。放入用水润湿的过滤装置中，立即排干并根据经过验证的程序进行清洗（见 13.3.4）。将滤膜转移到 ISO 21148 规定的指定琼脂培养基表面。
⎯ 膜在 32.5 °C ± 2.5 °C 下有氧培养 72 小时 ± 6 小时。
⎯ 菌落形成单位计数CFU数，计算每毫升或每克产品的需氧常温细菌数。

第四种方法“富集法检测细菌”
富集法测定细菌包括以下步骤：
⎯32.5℃± 2.5 在含有合适的中和剂和/或分散剂的非选择性液体介质中，将规定量的起始悬浮液在 °C 下孵育至少 20 小时。
——将规定量的先前悬浮液转移到非选择性固体琼脂培养基。
⎯ 32.5 °C ± 2.5 °C 需氧培养 48 至 72 小时。
⎯ 检测每个产品 S 样品的需氧常温细菌的生长，并将结果表示为“存在” /缺席”。